在細胞觀察實驗中,常常需要找回之前觀察過的某個細胞。
常規(guī)方法:初步觀察找到感興趣的細胞,用記號筆在培養(yǎng)皿/板的底部畫個圈。下次再觀察的時候,根據(jù)記號,再在顯微鏡下尋找之前的細胞。
缺點:
1.由于底部記號筆的標記,使得成像照片上有陰影;
2.想直接觀測目標細胞的免疫熒光結果,卻因為培養(yǎng)皿/板底部的顯微成像效果不理想,而無法得到好的免疫熒光成像。
現(xiàn)在分享一種好方法,讓大家輕松找回原來看過的細胞!
目的:找回之前觀察過的細胞
耗材:帶計數(shù)格培養(yǎng)皿(品牌:ibidi,總代:雷萌生物)
圖1 培養(yǎng)皿底部帶計數(shù)格坐標
圖2 培養(yǎng)皿底部計數(shù)格的示意圖
步驟:找到感興趣的細胞后,記下細胞的坐標信息(橫坐標是字母,縱坐標是數(shù)字),下次再觀察時,根據(jù)坐標信息找到細胞的位置,即可繼續(xù)觀察同一個細胞。
拓展應用:
1.底部的計數(shù)格可直接用于細胞計數(shù),計數(shù)細胞無需轉移到計數(shù)板了;
圖3 邊長500微米的計數(shù)格
圖4 邊長50微米的計數(shù)格
2.鎖定感興趣的細胞,直接在培養(yǎng)皿里做免疫熒光實驗
圖5 小鼠免疫熒光染色效果(使用ibidi 35毫米培養(yǎng)皿的實驗效果)
如何選擇不同規(guī)格的計數(shù)格培養(yǎng)皿/載玻片?
根據(jù)實驗目的來!
*指倒置熒光顯微鏡,共聚焦顯微鏡等顯微鏡
**使用玻璃底的產品還可以有配套的蓋子進行DIC活細胞成像